Pse përdoret glukoza në izolimin e ADN-së plazmide?
Pse përdoret glukoza në izolimin e ADN-së plazmide?

Video: Pse përdoret glukoza në izolimin e ADN-së plazmide?

Video: Pse përdoret glukoza në izolimin e ADN-së plazmide?
Video: 7 лайфхаков с ГОРЯЧИМ КЛЕЕМ для вашего ремонта. 2024, Prill
Anonim

Qëllimi i këtij hapi është rritja e vëllimit fillestar të qelizave në mënyrë që më shumë ADN plazmidike mund të izolohet për përgatitje. Glukoza shtohet për të rritur presionin osmotik jashtë qelizave. Tris është një agjent buferik të përdorura për të mbajtur një pH konstant (= 8.0).

Po kështu, cili është roli i glukozës në nxjerrjen e ADN-së?

50 mm (milimolare) sheqer glukozë shtohet në tampon GTE për të ruajtur osmolaritetin ku përqendrimi i lëndës së tretur jashtë qelizave është afër atij brenda qelizave. Kjo parandalon lizën e parakohshme të qelizave, e cila mund të shkaktojë më pak ADN-ja jep për shkak të grumbullimit dhe degradimit.

Për më tepër, pse përdoret NaOH në nxjerrjen e ADN-së? Në Izolimi i ADN-së ose nxjerrje , NaOH ( Hidroksid natriumi ) është të përdorura si tampon lize alkaline. Në thelb ndihmon në shpërndarjen e membranës qelizore në mënyrë që përbërësit e brendshëm të qelizës duke përfshirë ADN-ja dalë jashtë.

Nga kjo, cili është qëllimi i izolimit të ADN-së plazmidike?

Izolimi plazmid . Të izolim e ADN plazmidike nga bakteret është një teknikë thelbësore në biologjinë molekulare dhe është një hap thelbësor në shumë procedura si klonimi, ADN-ja sekuenca, transfeksioni dhe terapia gjenetike. Këto manipulime kërkojnë izolim me pastërti të lartë ADN plazmidike.

Si e izoloni ADN-në plazmide nga E coli?

Të izolim e ADN plazmide nga E . coli përdorimi i një lize alkaline është një metodë e mirëpërcaktuar. E . coli me plazmidi kultivohet në mjedise me antibiotikë deri në një densitet të lartë qelizor, mblidhet dhe më pas lizohet me një tretësirë SDS/NaOH.

Recommended: