Përmbajtje:

Si të futni një gjen në një plazmid?
Si të futni një gjen në një plazmid?

Video: Si të futni një gjen në një plazmid?

Video: Si të futni një gjen në një plazmid?
Video: Një udhëtim në kodin gjenetik: Aida Bytyçi at TEDxPrishtina 2024, Nëntor
Anonim

Hapat bazë janë:

  1. Pritini hapin plazmidi dhe "ngjit" në gjen . Ky proces mbështetet në enzimat kufizuese (të cilat prenë ADN-në) dhe ligazën e ADN-së (që bashkon ADN-në).
  2. Fut të plazmidi në bakteret.
  3. Rriteni shumë plazmidi -bartin bakteret dhe i përdorin ato si "fabrika" për të bërë proteinën.

Gjithashtu, si mund të futet një gjen në një plazmid GCSE?

eshte futet në një plazmid duke përdorur enzimat e ligazës. të plazmidi shkon në një qelizë bakteriale. bakteri transgjenik riprodhohet, duke rezultuar në miliona baktere identike që prodhojnë insulinë njerëzore.

Për më tepër, si mund të nënklononi një gjen? Hapat bazë për Nënklonimi Ju lëshoni dhe pastroni insertin tuaj nga vektori mëmë, lidhni këtë insert në një vektor destinacioni të përgatitur, transformoni këtë reaksion të lidhjes në qeliza bakteriale kompetente. Pastaj ju kontrolloni qelizat e transformuara për insert.

Duke e mbajtur këtë në konsideratë, cilat janë 4 hapat e klonimit të gjeneve?

Në protokollet klasike të tretjes së enzimës kufizuese dhe klonimit të lidhjes, klonimi i çdo fragmenti të ADN-së përfshin në thelb katër hapa:

  • izolimi i ADN-së me interes (ose ADN-së së synuar),
  • lidhja,
  • transfeksioni (ose transformimi) dhe.
  • një procedurë shqyrtimi/seleksionimi.

Si e amplifikoni një plazmid?

Procedurë eksperimentale

  1. Kryeni PCR dhe pastroni produktin PCR: Kryeni PCR për të amplifikuar ADN-në tuaj të futur.
  2. Tret ADN-në tuaj:
  3. Izoloni futjen dhe vektorin tuaj duke pastruar xhel:
  4. Lidheni insertin tuaj në vektorin tuaj:
  5. Transformimi:
  6. Izoloni plazmidën e përfunduar:
  7. Verifikoni plazmidën tuaj duke renditur:

Recommended: