Si funksionon klonimi i Gibson?
Si funksionon klonimi i Gibson?

Video: Si funksionon klonimi i Gibson?

Video: Si funksionon klonimi i Gibson?
Video: Рокин Факин #36 - Gibson Melody Maker Special (США, 2011 год) 2024, Nëntor
Anonim

Të Klonimi i Gibsonit Master Mix përbëhet nga tre enzima të ndryshme brenda një buferi të vetëm. Çdo enzimë ka një funksion specifik dhe unik për reaksionin: Ekzonukleaza T5 - krijon mbingarkesa 3' të ADN-së me një varg duke përtypur nga fundi 5' i ADN-së. Fragmentet plotësuese të ADN-së mund të kalojnë më pas me njëri-tjetrin.

Duke marrë parasysh këtë, si funksionon Gibson?

Të Gibson Metoda Asambleja® është një procedurë klonimi që lejon klonimin e dy ose më shumë fragmenteve pa pasur nevojë për tretje të enzimave kufizuese ose vende të përputhshme kufizuese. Në vend të kësaj, skajet e mbivendosura të përcaktuara nga përdoruesi inkorporohen në fragmente për të lejuar bashkimin pa probleme të fragmenteve ngjitur.

Në mënyrë të ngjashme, çfarë është në Gibson Assembly Master Mix? Të Gibson Cloning Master Mix përbëhet nga tre enzima të ndryshme brenda një buferi të vetëm. Çdo enzimë ka një funksion specifik dhe unik për reaksionin: Ekzonukleaza T5 - krijon mbingarkesa 3' të ADN-së me një varg duke përtypur nga fundi 5' i ADN-së. Fragmentet plotësuese të ADN-së mund të kalojnë më pas me njëri-tjetrin.

Në këtë mënyrë, si funksionon montimi i Golden Gate?

Porta e Artë klonimi ose Asambleja Golden Gate është një metodë klonimi molekular që i lejon një studiuesi të mbledhë njëkohësisht dhe në mënyrë të drejtuar disa fragmente të ADN-së në një pjesë të vetme duke përdorur enzimat kufizuese të tipit IIs dhe ligazën e ADN-së T4. Kjo montimi është kryhet in vitro.

Si funksionon klonimi i Gateway?

Të Klonimi GATEWAY Teknologjia bazohet në sistemin e rikombinimit specifik të vendit të përdorur nga fagu 1 për të integruar ADN-në e tij në E. Vendet attL dhe attR që rrethojnë ADN-në e futur të fagut rikombinohen në mënyrë specifike gjatë ngjarjes së ekscisionit për të reformuar vendin attP në fagun l dhe siti attB në E.

Recommended: