Cili është qëllimi i përdorimit të ddNTP-ve?
Cili është qëllimi i përdorimit të ddNTP-ve?

Video: Cili është qëllimi i përdorimit të ddNTP-ve?

Video: Cili është qëllimi i përdorimit të ddNTP-ve?
Video: Sanger method of DNA sequencing involves ddNTPs. | 12 | BIOTECHNOLOGY AND ITS APPLICATION | BIO... 2024, Nëntor
Anonim

DdNTP i referohet Dideoksinukleotidet trifosfatet të cilat përdoren në metodën didoksi Sanger për të prodhuar gjatësi të ndryshme të vargjeve të ADN-së për renditjen e ADN-së. Kjo rezulton në përfundimin e procesit të polimerizimit (ose zgjatjes së ADN-së) sepse ky proces ka nevojë për një grup 3'-OH për të vazhduar.

Prandaj, pse përdoren ddNTP-të në renditje?

Dideoksinukleotidet janë frenues që zgjasin zinxhirin e ADN polimerazës, të përdorura në metodën Sanger për ADN-në renditjen e renditjes . Dideoksiribonukleotidet nuk kanë një grup hidroksil 3', prandaj nuk mund të ndodhë asnjë zgjatim i mëtejshëm i zinxhirit pasi ky didoksinukleotid të jetë në zinxhir. Kjo mund të çojë në përfundimin e ADN-së sekuencë.

Në mënyrë të ngjashme, a bashkohen ddNTP-të me dNTP-të? Një ose më shumë nga dNTP janë etiketuar në mënyrë radioaktive për të ndihmuar në vizualizimin e produkteve të riprodhimit. Më në fund, çdo tub merr një nga katër nukleotidet speciale të quajtura dideoksinukleotidet ( ddNTP ) Megjithatë, pasi të inkorporohet, ADN polimeraza nuk mund të zgjerojë më tej zinxhirin sepse i duhet një 3'-OH për të bashkëngjit te nukleotidi tjetër.

Në mënyrë të ngjashme, dikush mund të pyesë, si e ndalojnë ddNTP-të një reaksion renditjeje?

Kur është i pranishëm në sasi të vogla në reaksionet e renditjes , trifosfate didoksiribonukleozide ( ddNTP ) përfundojnë reaksioni i renditjes në pozicione të ndryshme në vargjet në rritje të ADN-së. ddNTP-të ndalojnë një reaksion renditjeje sepse ato: bëjnë që ADN polimeraza të bjerë nga vargu i shabllonit. c.

Cila teknikë që përfshin dideoksinukleotidet mund të përdoret?

Sekuenca e Sanger është a metodë e sekuencës së ADN-së bazuar në përfshirjen selektive të zinxhirit-përfundues dideoksinukleotidet nga ADN polimeraza gjatë replikimit in vitro të ADN-së. Zhvilluar nga Frederick Sanger dhe kolegët në 1977, ishte më i përhapuri të përdorura renditjen e renditjes metodë për rreth 40 vjet.

Recommended: