Si funksionon sekuenca e ADN-së Sanger?
Si funksionon sekuenca e ADN-së Sanger?

Video: Si funksionon sekuenca e ADN-së Sanger?

Video: Si funksionon sekuenca e ADN-së Sanger?
Video: Technique Séquençage ADN 2024, Nëntor
Anonim

Sekuenca e Sanger rezulton në formimin e produkteve të zgjatjes me gjatësi të ndryshme të përfunduara me dideoksinukleotide në skajin 3'. Produktet e zgjerimit më pas ndahen me elektroforezë kapilare ose CE. Molekulat injektohen nga një rrymë elektrike në një kapilar xhami të gjatë të mbushur me një polimer xhel.

Në këtë mënyrë, cila është metoda Sanger e sekuencës së ADN-së?

Sekuenca e Sanger , i njohur gjithashtu si përfundimi i zinxhirit metodë , është një teknikë për Sekuenca e ADN-së bazuar në inkorporimin selektiv të dideoksinukleotideve që përfundojnë zinxhirin (ddNTPs) nga ADN-ja polimeraza gjatë in vitro ADN-ja përsëritje. Ajo u zhvillua nga Frederick Sanger dhe kolegët në 1977.

Gjithashtu, si funksionon sekuenca e përfundimit të zinxhirit? Sanger ADN renditjen e renditjes njihet edhe si zinxhir - përfundimi metoda e renditjen e renditjes . ddNTP-të rezultojnë në përfundimi të vargut të ADN-së sepse ddNTP-ve u mungon grupi 3'-OH i nevojshëm për formimin e lidhjes fosfodiesterike ndërmjet nukleotideve. Pa këtë lidhje, zinxhir e nukleotideve që formohen është përfunduar.

Thjesht kështu, pse bëjmë sekuencën e Sanger?

Sekuenca Sanger është a metodë e Sekuenca e ADN-së bazuar në inkorporimin selektiv të dideoksinukleotideve që përfundojnë zinxhirin nga ADN-ja polimeraza gjatë in vitro ADN-ja përsëritje. Ende ka përparësi ndaj leximit të shkurtër renditjen e renditjes teknologjive (si Illumina) që ajo mund prodhoj Sekuenca e ADN-së lexon më shumë se 500 nukleotide.

A është i saktë renditja e Sanger?

Sekuenca e Sanger me 99.99% saktësi është "standardi i artë" për kërkimin klinik renditjen e renditjes . Megjithatë, teknologjitë më të reja NGS po bëhen gjithashtu të zakonshme në laboratorët e kërkimit klinik për shkak të aftësive të tyre më të larta të xhiros dhe kostove më të ulëta për mostër.

Recommended: